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液相色譜知識

  • 反相柱極性大的先出峰

    反相柱的極性較大的化合物在柱子中的保留時間相對較短,因此它們通常會先出峰。較大極性的化合物在反相柱上與柱子的非極性固定相相互作用較弱,因此在洗脫過程中很快地被洗脫出來。反相柱的固定相通常是由含有親油基團(如碳鏈或苯環)的非極性化合物構成的。在反相柱上,較極性的化合物與非極性固定相之間的作用力較弱,容易從柱子上洗脫下來。與此相對應的是,極性較小的化合物與非極性固定相之間的作用力較強,容易被固定相保留

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  • 反相柱上樣量

    反相柱的上樣量沒有規定的固定值,而是根據柱子的尺寸、樣品類型、分析目的和儀器要求等因素來確定。一般來說,上樣量應該在柱子承受范圍內,并且要保持在柱子的線性范圍內,以避免過載或損壞柱子。一般情況下,常規分析中的上樣量在微克至毫克范圍內,對于一般的HPLC柱,上樣量通常在1-10微克之間。對于高靈敏度的分析或特定樣品的分析,上樣量可能會低于1微克。同時,在上樣過程中也應考慮樣品的溶解度,不要過量上樣導

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  • 反相柱和正相柱的區別

    反相柱和正相柱是兩種常見的色譜柱類型,它們在分析樣品時有一些重要的區別。1. 原理不同: 反相色譜是基于液體相對于固定相而言具有較強極性的原理,常用的固定相是疏水性的碳鏈;而正相色譜是基于液相對固相而言具有較弱極性的原理,常用的固定相是親水性的硅膠或氨基硅膠。2. 選擇性不同: 由于反向和正相柱的固定相性質不同,它們對樣品的選擇性也不同。反相柱通常用于非極性或中等極性的化合物,而正相柱則更適用于極

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  • 反相色譜極性大小出峰順序

    在反相色譜中,化合物的極性大小對出峰順序有較大影響。一般情況下,極性較小的化合物會先被洗脫出來,而極性較大的化合物則停留時間較長,后被洗脫。具體來說,以下是一般情況下極性大小出峰順序的規律:1. 非極性化合物:這些化合物與反相柱的填料相互作用較弱,因此在反相色譜中停留時間較短,先被洗脫出來。2. 低極性化合物:這些化合物具有一定的極性,與反相柱的填料相互作用較強,但仍相對較小,停留時間較長,稍后被

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  • 反相柱的洗脫順序

    在反相柱上分離化合物時,一般的洗脫順序是從極性物質向非極性物質逐漸增加。這是因為反相柱的填料通常是疏水性的,與溶劑中的水相互作用較差,因此溶于水中的極性化合物在柱上停留時間較長,洗脫順序會受到他們的極性程度的影響。下面是常見的洗脫順序:1. 非極性化合物:這些化合物不與填料具有明顯相互作用,所以在反相柱上停留時間較短,一般會在初始的洗脫階段被洗脫出來。2. 中極性化合物:這些化合物具有一定的極性,

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  • 高效液相色譜柱的柱效參數

    高效液相色譜柱的柱效參數(Column Efficiency Parameters)是衡量柱子分離性能和效率的重要指標。以下是常見的柱效參數:1. 理論板數(Theoretical Plates):理論板數是衡量柱子分離效果和分離程度的一個重要參數。它表示在理想情況下,一組理論板(效率相等的連續分離階段)能夠實現的柱效。一般用N表示,計算公式為N = 16 * (tr / W) ^ 2,其中tr為

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  • 反相高效液相色譜柱

    反相高效液相色譜柱(reversed-phase HPLC column)是一種常用的HPLC柱,用于分離非極性或中極性化合物。反相柱是HPLC分析中應用最廣泛的柱類型之一。反相柱的填料通常是由一種具有親水性的羧酸類吸附劑(如C18、C8等)涂覆在硅膠或者親水性載體上構成。這種親水層在分析過程中形成“水膜”,而非極性或中極性溶質在該層上不易被吸附,從而實現了溶質的分離。反相柱對于非極性或中極性化合

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  • 液相柱體積計算公式

    液相柱體積計算公式液相柱的體積可以通過以下公式計算:體積(V) = π * r2 * L其中,V 是液相柱的體積(單位為 mL 或 cm3);π 是圓周率,約為3.14;r 是液相柱的半徑(單位為 cm);L 是液相柱的長度(單位為 cm)。注:在實際計算中,常常使用直徑(D)而非半徑(r)表示液相柱的尺寸。可以使用以下公式將直徑轉換為半徑:r = D / 2所以,液相柱的體積(V)也可以用以下公

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