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液相色譜知識(shí)

c18色譜柱活化方法

2023-08-11 Vink

C18色譜柱是一種廣泛應(yīng)用于分離和純化化合物的常見(jiàn)色譜柱。在使用C18色譜柱之前,有時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行活化,以確保最佳的分離效果和性能。以下是一些常用的C18色譜柱活化方法:


1. 洗脫劑活化法:使用有機(jī)溶劑(例如甲醇或乙腈)作為洗脫劑,以高流速(例如1-2 mL/min)通過(guò)色譜柱進(jìn)行洗脫。可以使用純有機(jī)溶劑或者混合有機(jī)溶劑/水組成的溶劑體系進(jìn)行洗脫。通常需要洗脫柱體積的5-10倍才能完全活化柱子。


2. 堿性洗脫劑活化法:使用堿性洗脫劑(如0.1M氫氧化鈉或氨水)作為洗脫劑,以適當(dāng)?shù)牧魉偻ㄟ^(guò)色譜柱進(jìn)行洗脫。在使用堿性洗脫劑時(shí),需要注意柱的耐受性和避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的接觸,以免對(duì)柱造成損害。


3. 酸性洗脫劑活化法:使用酸性洗脫劑(如1%的三氟醋酸或鹽酸)作為洗脫劑,以適當(dāng)?shù)牧魉偻ㄟ^(guò)色譜柱進(jìn)行洗脫。在使用酸性洗脫劑時(shí),同樣需要注意柱的耐受性和避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的接觸。


在活化C18色譜柱之后,通常需要重新平衡柱子,以使其達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。重新平衡可以使用初始的流動(dòng)相條件進(jìn)行,然后再根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行調(diào)整。在進(jìn)行分析之前,最好進(jìn)行一系列的均衡運(yùn)行,以確保柱子表現(xiàn)出穩(wěn)定的性能。


需要注意的是,每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件和色譜柱可能會(huì)有所不同,最佳的活化方法可能因?qū)嶒?yàn)需求而異。因此,建議根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求和柱子制造商的推薦,選擇適合的活化方法。在活化色譜柱時(shí),應(yīng)仔細(xì)操作,避免超過(guò)柱子的最大工作壓力并保證柱子的安全使用。


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